干细胞培养技术之干细胞标准培养方法

分享三种干细胞培养的标准培养方法
2023-10-11
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干细胞培养难度大,需要充足的营养成分对其进行支持,对于培养体系及试验人员的技术的也有更高的要求。目前常用的标准干细胞培养方法有三种:传统的饲养层培养法和无饲养层培养法,以及近几年新兴的干细胞直接培养法。

饲养层培养法,先对饲养层细胞进行培养,再将干细胞接种到饲养层细胞上,最后收获所需的干细胞,该过程需要一周或更长的培养时间。优点:培养干细胞效果相对较好;缺点:实验流程冗杂,使用的试剂复杂,实验周期很长,对实验人员的熟练度有较高要求。

无饲养层培养法,直接培养干细胞,无需培养饲养层细胞。优点:培养流程简单,缺点:需自行优化培养液,有时需要花大力气去测试血清、培养基及添加因子的种类和比例,非常耗时耗力,且培养出来的干细胞稳定性也不太容易保证。

干细胞直接培养法是近几年,随着干细胞专用培养基的诞生,逐渐开始的干细胞培养法。干细胞直接培养,无饲养层细胞参与。加入的培养液是已经商业标准化的干细胞专用培养基,大多无需配制,可直接使用。优点:培养液无需探索配方,可直接使用;实验流程简单。缺点:由于不同厂家的干细胞专用培养基的配方不同,所以有相当多的干细胞挑不到合适的完全培养基,培养效果不好。很多价格昂贵,是传统培养液(胎牛+普通培养基+添加细胞因子)数倍。

干细胞培养基.jpg

但随着新技术的不断革新,近两年出现的一款Ausbian干细胞完全培养基,以其方便,通用,价格等优势,基本规避以上缺点,越来越多的实验人员使用。

1、它是即用型干细胞培养基,解冻后开瓶即用,无需二次配制

2、一款培养可应用在各类干细胞培养中,效果理想,如长期培养,仍可较好地保留细胞的干性;

3、价格适中,与胎牛血清+基础培养基+细胞因子这类传统培养体系相比,价格略高或价格相当。

Ausbian干细胞完全培养基的工作原理,在含微量胎牛血清的基础培养基中,添加一种人永生化干细胞系的条件培养基混合物,共同组成,其中已含有EGFFGFNGFHGFBDNFPDGFVEGFTGF及干细胞分化抑制因子等成分,且为天然比例,更符合干细胞生长繁殖的自然规律,对于各类干细胞具有通用性,且培养效果满意。

这款Ausbian干细胞完全培养基,可长期储存在-20冰箱中,一年以上。在使用时,无需额外添加细胞因子或其他人工合成促生长成分,无需二次配制,解冻后即可直接使用,根据细胞生长情况每 2-3 天更换一次培养基即可,实验人员简单方便地即可完成促进干细胞增殖、延缓干细胞分化及维持干细胞表型,增加干细胞的传代次数的目的,在人及动物的胚胎干细胞、间充质干细胞及各种组织来源的成体干细胞的培养中均可使用。由于实验步骤大幅精简,因此对实验人员的操作技术也相对不会过为严苛。

通过实验发现,Ausbian干细胞完全培养基能够有效维持干细胞的干性,延缓干细胞的分化养出纯度更高、遗传物质更稳定的干细胞

所培养的干细胞。培养细胞有效性方面,许多科研人员对其进行了评估:培养间充质干细胞可以细胞传代次数 8-10 次、培养成体干细胞可以使细胞的增殖速率增加 300%,实验数据真实可靠。

人间充质干细胞培养.png人体干细胞培养实验.png

需要说明的是,由于此款培养基添加了1.5%-2%左右的胎牛血清(经过辐照),Ausbian干细胞完全培养基更适用于科研领域,在细胞治疗等临床项目中应用时,申报工作需做特别说明。

由于干细胞专用培养基的出现,让干细胞培养变得更简单;而Ausbian干细胞完全培养基的出现,让干细胞的培养变得更容易。相信随着科技的飞速发展和不断涌现的创新产品,会有越来越多的干细胞新型培养工具得以应用,让人类在研究和探索干细胞领域的道路上,走得更高更远。

北京缔一生物科技有限公司国内总代Ausbian品牌,德国Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。细胞培养实验使用的Ausbian澳洲进口特级胎牛血清,新生牛血清,干细胞培养基,马血清,德国MB支原体检测/祛除试剂盒,DNA污染祛除试剂,支原体PCR/qPCR定量试盒等产品。欢迎访问缔一生物官网:www.dyshengwu.com。联系电话:4006661688。

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