聚合酶链反应(PCR)是一种重要的分子生物学技术,广泛应用于基因分析、疾病诊断和生物学研究、生物学检测等过程中。
PCR:
普通的PCR是一种在体外扩增特定DNA序列的技术。它包括三个步骤:变性、退火和延伸。通过使用引物、DNA模板和DNA聚合酶,可以在热循环过程中多次复制目标DNA,从而快速扩增特定片段。
荧光PCR(qPCR):
qPCR是PCR的实时荧光变种。它通过在PCR过程中引入荧光探针,实时监测扩增反应的进程。这种荧光探针与目标DNA序列的特定区域结合,当DNA扩增过程中的荧光信号增加时,可以定量测量目标DNA的存在量。
检测方法:PCR和qPCR都是间接检测方法,依赖于荧光探针或染料的结合和信号产生。
定量精度:qPCR具有较高的定量精度,可以准确测量目标DNA的存在量。
灵敏度:qPCR通常比PCR更敏感。
成本和复杂度:PCR和qPCR的成本相对较低,仪器设备和试剂较为普及。
样本处理:qPCR通常需要对样本进行前处理,如提取和纯化DNA,以获得较好的扩增效果。