如何选择PCR热启动Taq酶？

目前国内市场上销售的热启动Taq酶的品牌很多，但真正高质量的热启动Taq酶并不多，面对这么多的热启动Taq酶产品，我们应如何选择？

选择扩增效率高的热启动Taq酶

耐受性好的Taq酶反应体系经优化后，扩增效率在95%以上，即使是在目标基因含量较低时也能够获得满意的扩增，在模板量较高时，也不易中毒，指数扩增期较长。耐受性能较差的Taq酶，即使反应体系经多次优化，扩增效率仍达不到90%，扩增曲线“S”型不明显，斜率较小，曲线低平。模板量较低时扩增不出来，较高时扩增效果也不理想。所以PCR扩增效率与Taq酶的性能密切相关，选择高扩增效率的DNA聚合酶对PCR、qPCR能否成功至关重要。

选择酶动力强的热启动Taq酶

Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强，PCR扩增的指数增长期越长，‘S型’曲线更加典型，荧光信号值更高，而且更适合做多重PCR检测。酶动力弱的品牌DNA聚合酶一般只能支持2重反应，在做3重反应时，扩增曲线低矮，荧光信号值较低，无典型扩增曲线，结果很难判定。

选择灵敏度高的热启动Taq酶

一般说，DNA聚合酶的扩增效率高，灵敏度就高，但也有不一致的情况。如果要扩增的样本目标基因丰度较低，建议对Taq酶的扩增灵敏度进行检测。

Taq酶的扩增灵敏度进行检测，常见的检测方法是将目标基因质粒片段进行10倍或5倍梯度稀释，在较低的几个稀释度进行PCR检测，选择检测灵敏度较高的热启动Taq酶。

由此可见，研究者需根据自己的实验要求和经费情况进行选择，**做一个梯度稀释扩增实验，以检测热启动Taq酶的扩增效率和灵敏度。

北京缔一生物科技有限公司 国内总代理的德国MB 产品

MB Taq聚合酶 1 Unit/µl浓度    MB TAQ DNA Polymerase

描述

MB Taq DNA聚合酶是一种高效的3’→5’聚合酶，没有5’→3’外切核酸酶活性。在72℃和大约pH9的条件下，MB Taq DNA聚合酶达到它最高水平的活性，能够在大约30秒内扩增标准的1 kb DNA链。

Taq酶活性在室温时被阻断，例如在准备样品时。当温度高于70℃时，Taq聚合酶的抑制被完全逆转。在94℃ 2分钟后聚合酶达到完全活化。MB Taq DNA聚合酶带有10x缓冲液，以便达到理想产率产率和灵敏度，已足以适合大多数的常规用途。

推荐使用

常规和多重PCR；实时荧光定量PCR；T/A克隆；生物素、地高辛或放射性核苷酸标记DNA；双链或单链DNA测序。