PCR反应的核心成分当然是DNA聚合酶了,常见的DNA聚合酶如Taq、Pfu、KOD、Primerstar等,常温聚合酶包括Klenow、Bst、Phi29等。根据保真度来分,高保真聚合酶Pfu、KOD、Phanta等,普通聚合酶Taq等。那这么多DNA聚合酶,该如何选呢?
在使用Taq酶进行扩增时,有时会出现非特异性扩增,可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染,引物特异性如何,Mg2+浓度偏高等等,其中一个不可忽视的原因是DNA聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物,可以选择热启动酶重新实验,即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类:一类是化学法修饰的热启动酶,如Ace Taq ,预变性95℃5-10min即可释放酶活;一类是抗体法修饰的热启动酶,如Champagne Taq ,预变性95℃30s即可释放酶活。使用时注意预变性时间,方能获得满意的扩增效果。
缔一生物提供的德国M产品,热启动DNA聚合酶 MB TAQ DNA Polymerase
品名 | 货号 | 规格 |
热启动DNA聚合酶 MB TAQ DNA Polymerase | 53-0050 | 50Units |
热启动DNA聚合酶 MB TAQ DNA Polymerase | 53-0100 | 100Units |
热启动DNA聚合酶 MB TAQ DNA Polymerase | 53-0200 | 200Units |
热启动DNA聚合酶 MB TAQ DNA Polymerase | 53-0250 | 250Units |
MB Taq DNA聚合酶是一种高效的5‘→3’聚合酶,没有3‘→5’外切核酸酶活性。在72℃和pH9的条件下,MB Taq DNA聚合酶达到其最高水平的活性,能够在30秒内扩增1 kb DNA。
Taq的活性在室温时被阻断,例如在准备样品时。当温度高于70℃时,Taq聚合酶的抑制被完全逆转。在94℃2分钟后聚合酶达到完全活化。MBTaq DNA聚合酶带有10x缓冲液,能获得**产率和灵敏度,这应符合大多数标准应用。
MB热启动DNA聚合酶推荐使用/范围
常规和多重PCR;实时PCR;T/A克隆;生物素/地高辛或放射性核苷酸进行DNA标记;双链或单链标准DNA测序。
试剂盒组分
MB Taq DNA聚合酶,提供在10mM Tris-HCl(pH7.0),50mM KCl,0.1mM EDTA和50%(v / v)甘油中。 10X反应缓冲液。100mMMgCl 2溶液。
如果聚合酶与Venor®GeM或Venor®GeM Advance联合使用,则不需要使用缓冲液。
保质期和储存
组分必须储存在-18°C。冰袋运输。该产品稳定至少6个月。
北京缔一生物科技有限公司国内总代Ausbian品牌,德国Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。细胞培养实验使用的Ausbian澳洲进口特级胎牛血清,新生牛血清,干细胞培养基,马血清,德国MB支原体检测/祛除试剂盒,DNA污染祛除试剂,支原体PCR/qPCR定量试盒等产品。欢迎访问缔一生物官网:www.dyshengwu.com。联系电话:4006661688。