PCR检测之Taq聚合酶作用

   PCR检测之Taq聚合酶作用

大多数体外扩增应用使用耐热酶进行聚合酶链反应(PCR)。最常用的 PCR 酶是 Taq DNA 聚合酶。那Taq 聚合酶应用哪些方面呢？

基因分型

通过PCR 进行基因分型，使用设计用于特异性扩增突变的引物确定生物体的基因型（例如 WT 或突变体）。

使用修饰核苷酸进行PCR

底物包括dNTP、ddNTP、dUTP、肌苷、生物素-11-dUTP、DIG-11-dUTP 和荧光-dNTP/ddNTP。

单菌落PCR

通过裂解细菌，然后使用插入片段特异性或载体特异性引物进行扩增，利用PCR 快速筛选 DNA 插入片段。

使用3'-A 单链突出端进行 TA 克隆

Taq 将单个 A 添加到 dsDNA 的 3’ 端，然后将 PCR 产物与具有互补 3′-T 单链突出端的载体混合。