随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入,PCR已成为一门相当成熟的常规技术,而热聚合酶(即Taq酶)的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。目前市面上Taq酶大致分为两种,标准Taq聚合酶和热启动聚合酶,能够满足多方面的实验需要。
标准Taq聚合酶在72°C时发挥**活性,但在37°C左右就开始表现出活性。这种低温活性不容忽视,因此具有在 PCR 反应的初始较低温度阶段允许非特异性扩增和误引发事件的缺点。如果您需要实现 PCR 自动化,那么可以考虑使用热启动 Taq 聚合酶。
热启动聚合酶与标准Taq不同,它在常温下没有活性。热启动 PCR 技术遵循与常规 PCR 相同的原理,但直到完成**个变性步骤之前,酶活性始终处于抑制状态。这**限度减少了非特异性结合和误引发,从而提高了特异性。此外,该技术提供了在室温下构建反应体系的显著便利性,使得 PCR 自动化成为可能。在某些情况下,灵敏度也会提高,因为非特异性扩增会大量消耗特异性目标扩增所需的反应体系组分。
北京缔一生物科技有限公司 国内总代理的德国MB产品MB Taq 热启动DNA聚合酶 MB TAQ DNA Polymerase
MB Taq DNA聚合酶是一种高效的5‘→3’聚合酶,没有3‘→5’外切核酸酶活性。在72℃和pH9的条件下,MB Taq DNA聚合酶达到其最高水平的活性,能够在30秒内扩增1 kb DNA。
Taq的活性在室温时被阻断,例如在准备样品时。当温度高于70℃时,Taq聚合酶的抑制被完全逆转。在94℃2分钟后聚合酶达到完全活化。MBTaq DNA聚合酶带有10x缓冲液,能获得更大产率和灵敏度,这应符合大多数标准应用。
MB Taq 热启动DNA聚合酶推荐使用/范围
常规和多重PCR;实时PCR;T/A克隆;生物素/地高辛或放射性核苷酸进行DNA标记;双链或单链标准DNA测序。
MB Taq 热启动DNA聚合酶试剂盒组分
MB Taq DNA聚合酶,提供在10mM Tris-HCl(pH7.0),50mM KCl,0.1mM EDTA和50%(v / v)甘油中。 10X反应缓冲液。100mMMgCl 2溶液。
如果聚合酶与Venor®GeM或Venor®GeM Advance联合使用,则不需要使用缓冲液。
保质期和储存
组分必须储存在-18°C。冰袋运输。该产品稳定至少6个月。
北京缔一生物科技有限公司国内总代Ausbian品牌,德国Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。细胞培养实验使用的Ausbian澳洲进口特级胎牛血清,新生牛血清,干细胞培养基,马血清,德国MB支原体检测/祛除试剂盒,DNA污染祛除试剂,支原体PCR/qPCR定量试盒等产品。欢迎访问缔一生物官网:www.dyshengwu.com。联系电话:4006661688。